人生就是博-尊龙凯时推出了一款基于探针法荧光定量PCR原理开发的检测试剂盒,具备以下特性:
产品特点
1. 即开即用:用户无需进行复杂准备,只需提供样品DNA模板。
2. 优化引物:各组分经过精心优化,确保高灵敏度。
3. 提供阳性对照:包括阳性对照,帮助用户清晰区分假阴性样品。
4. 高特异性:引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区域,避免与其他生物样本DNA发生交叉反应。
5. 多功能检测:可进行定性和定量检测,定量检测的线性范围至少达到5个数量级。
6. 充足反应次数:本产品能够支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
7. 仅限科研使用:该产品仅适用于科研领域。
操作步骤
1. DNA提取
使用自选方法提取纯化样品DNA,确保与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 稀释标准曲线样品
为避免交叉污染,稀释操作应在独立区域内进行。具体步骤如下:
将6个离心管标记为7、6、5、4、3、2;用带芯枪头分别加入45μL DEPC-H2O。接下来依次进行阳性对照的稀释,得到不同浓度的标准曲线样品。
3. 试剂配制
根据待检样品数量准备对应的qPCR管。向每个PCR管中加入指定成分,具体配方请参考详细说明书。
4. 添加模板
向各qPCR管中加入2μL模板,添加顺序为阴性对照(DEPC-H2O)、待测样品模板和阳性对照,离心30秒后立即进行扩增反应。
5. 扩增反应
将PCR管放入PCR扩增仪器的样品槽中,设置相应的扩增程序。具体程序参数同时可在详细说明书中找到。
6. 结果分析
如果制作标准曲线,以阳性对照浓度的log值为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线。再根据待测样品的Ct值推算出样品DNA浓度的log值,最终得出浓度结果。
若未制作标准曲线,依据以下标准判定结果:Ct值<30的阳性对照须呈现明显的S型曲线;阴性对照Ct值应为38或者无Ct值;样本检测结果若Ct值<35且明显指数增长,则结果为阳性;若Ct值在35-38范围,则需复检。若复检仍在该范围且有明显指数增长,可判定为阳性,否则为阴性。
运输与保存
本产品需低温运输,保存于-20℃,保质期为一年。请注意,阳性对照需单独放置,避免污染其他试剂。
选择人生就是博-尊龙凯时的荧光定量PCR检测试剂盒,为您的研究提供高效可靠的支持!